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一．前言：
肠道菌筛选双糖管属组合式生化鉴定系统，能辅助鉴别相关肠道和食源性病原菌。生化和酶底物搭配能提高鉴别的准确性和特异性。适合小型公共卫生和临床机构等检测机构的样本初筛。
二．产品组成：
1、 肠道菌筛选双糖管1×20支
2、 肠道菌筛选双糖管2×20支
3、 吲哚试纸条×20条
4、 硫化氢试纸条×20条
5、 说明书1份
三．使用方法：
1、 以灭菌接种环或针从过夜培养选择性平板挑取单个菌落，接种于管1斜面后向下穿刺至底部。
2、 抽出接种环并塞好管塞后将接种环穿刺至管2管底。
3、 取出接种环，塞好管塞，烧灼接种环灭菌。
4、 打开管2，于管口部悬置吲哚和硫化氢试纸条，避免纸条间接触。
5、 将管1和2置36±
四．生化结果的判别和常见肠道菌病原菌的预期结果：见表1和表2
表1. 经36±
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鉴定项目 |
阳性 |
阴性 |
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管1 |
葡萄糖产酸 |
管1底部变为黄色，斜面不变色 |
管1仍为原色不变 |
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甘露醇产酸 |
管1底部与斜面均变为黄色 |
管1仍为原色不变 |
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葡萄糖产气 |
管1穿刺线附近产生气泡或裂缝 |
管1不产生气泡或裂缝 |
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尿素酶 * |
管1部分或全部变为蓝紫色 |
管1不产生蓝紫色 |
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管2 |
蔗糖产酸 |
管2变为黄色 |
管2仍为原色不变 |
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动力** |
管2琼脂变浑，穿刺线模糊不清 |
管2琼脂清澈，穿刺线清晰 |
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|
吲哚 |
吲哚试纸呈现红色 |
吲哚试纸不变色 |
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硫化氢 |
硫化氢试纸呈现黑色 |
硫化氢试纸不变色 |
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* 尿素酶阳性的情况下，可能影响管1其他项目的观察。 |
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** 肺炎克雷伯菌为动力阴性，但因具有粘液性荚膜抗原而外观常有特殊表现，应注意区别。 |
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表2. 重要的肠道病原菌对应组合生化和酶反应试验结果
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病原菌 |
管 |
第二管 |
酶显色平板 |
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氧化酶 |
葡萄糖 (下层) |
甘露醇 (上层) |
尿酶 |
蔗糖 |
动力 |
硫化氢 |
吲哚 |
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伤寒、副伤寒 |
- |
+ |
+ |
- |
- |
+/- |
-/+ |
- |
酒红色 |
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非伤寒、副伤寒 |
- |
⊕ |
+ |
- |
- |
+/- |
+/- |
- |
酒红色 |
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志贺菌A群 |
- |
+ |
+/- |
- |
- |
- |
- |
+ |
白色或淡红色1 |
|
志贺菌B群 |
- |
+ |
+ |
- |
- |
- |
- |
-/+ |
白色或淡红色 |
|
志贺菌C群 |
- |
+ |
+/- |
- |
- |
- |
- |
-/+ |
白色或淡红色2 |
|
志贺菌D群 |
- |
+ |
+ |
- |
- |
- |
- |
- |
蓝色3 |
|
小肠结肠耶尔森菌 |
- |
+ |
+/- |
+ |
+ |
+ |
- |
-/+ |
蓝色/白色4 |
|
小肠结肠耶尔森菌 |
- |
+ |
-/+ |
+ |
+/- |
- |
- |
- |
蓝色/白色 |
注：⊕：发酵产酸产气；+：发酵产酸；+/-：大多数阳性反应，少数阴性；-/+：大多数阴性反应，少数阳性。1：A群志贺Ⅰ型为兰色；2：C群鲍氏9型和15型为兰色；3：极个别菌ONPG阴性表现为白色或淡红色菌落；4：产毒生物型小肠结肠耶尔森菌可能为白色菌落生长。
五．注意事项：
1、 贮藏方法：2~30℃避光保存。日常保存竖直放置勿要倾倒，避免培养基水分因重力作用析出。
2、 如管2培养基有水渗出，将水倒去即可使用；或将管2水浴加热至培养基完全融化，冷却至培养基完全凝固即可使用，不影响实验结果。
3、 保质期：3个月。